Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Tootekirjeldus

产品名称

Toote nimi

杂交瘤细胞融合筛选培养基 (HAT)

Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Kat.nr

BRS-MED01

规格

Spetsifikatsioon

500 ml / µg

500 ml / pudel

产品组分

Komponendid

DMEM 基础培养基: 80% (体积比)

DMEM baaskeskkond: 80% (maht/maht)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Imporditud veiseloote seerum (FBS): 10% (maht/maht)

条件培养基:10%(体积比)

Konditsioneeritud sööde: 10% (maht/maht)

青霉素: 100 单位/ml

Penitsilliin: 100 U/ml

链霉素: 100 单位/ml

Streptomütsiin: 100 U/ml

次黄嘌呤 (hüpoksantiin): 100 uM

Hüpoksantiin: 100 uM

胸腺嘧啶核苷 (tümidiin): 16 uM

Tümidiin: 16 uM

氨基蝶呤 (aminopteriin): 0,4 uM

Aminopteriin: 0,4 uM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Muud lisandid: mitmesugused tsütokiinid (piisav kogus) ja toidulisandid

保存条件

Säilitustingimused

-20 kraadi 保存,有效期 18 个月.

Hoida -20 kraadi juures. Kõlblikkusaeg: 18 kuud.

使用方法

Kasutusjuhend

培养基融化:

37 kraadi 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象, 静置 3-5 min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Söötme sulatamine:

Sulatage sööde 37 kraadises veevannis. Pühkige välispind 70% etanooliga ja asetage kasutamiseks bioohutuskappi.
Märkus. Väikese koguse valge helbelise materjali ilmumine pärast sulatamist on normaalne. Laske söötmel 3–5 minutit seista, et helbed põhja settiksid, seejärel koguge supernatant kasutamiseks ettevaatlikult.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐积 睿 彮 齓 售, 齓 唓37 kraadi 5% CO2 培养箱静置培养.

Rakkude liitmine ja külvamine:

Tehke rakkude liitmine füüsikaliste (elektrofusioon) või keemiliste (tavaliste PEG) meetodite abil. Resuspendeerige sulatatud rakud otse selles söötmes sobiva tiheduse ja mahuga:

Elektrofusioon: 1 × 10⁴ – 2 × 10 4 rakku süvendi kohta

PEG-fusioon: 5 × 10⁴ – 1 × 105 rakku süvendi kohta
Soovitatav maht: 200 µL süvendi kohta 96-augulisel plaadil.
Kultiveerimiseks inkubeerige 37 kraadi juures 5% CO2.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Keskmine asendus:

4.–8. päeval pärast-fusiooni asendage söötme osaline või täielik asendamine vastavalt rakkude kasvuolekule.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Kloonide sõelumine:

Kui rakukloonid süvendites saavutavad sobiva suuruse, viige läbi positiivne kloonide sõelumine.

注意事项

Ettevaatusabinõud

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

See toode on mürgine ja on ette nähtud ainult hübridoomirakkude selektsiooniks ja kasvatamiseks. Seda ei tohi kasutada elusloomade kasvatamiseks, diagnostilistel eesmärkidel ega terapeutilistel eesmärkidel.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷筆胞 (如 NS1, SP2/0).

See toode sobib hübridoomirakkude selektsiooniks ja kasvatamiseks, kasutades HGPRT selektsioonisüsteemi. See ei kehti TK või muude valikusüsteemide jaoks. Seda söödet ei saa kasutada HGPRT-puudulike rakkude (nt NS1, SP2/0) otseseks kasvatamiseks.

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2-7,4, 取用需在无菌条件下进行.

See toode on steriilne lahus, mille pH on 7,2–7,4. Kogu käitlemine peab toimuma aseptilistes tingimustes.