Hübridoomirakkude laiendamise ja subkloonimise sööde 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Tootekirjeldus

产品名称

Toote nimi

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Hübridoomirakkude laiendamise ja subkloonimise sööde

货号 Kat.nr

BRS-MED02

规格

Spetsifikatsioon

500 ml / µg

500 ml/pudel

产品组分

Komponendid

DMEM基础培养基:80%(体积比)

DMEM baaskeskkond: 80% (maht/maht)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Veise loote seerum (FBS, imporditud): 10% (maht/maht)

条件培养基:10%(体积比)

Konditsioneeritud sööde: 10% (maht/maht)

青霉素: 100 单位/ml

Penitsilliin: 100 U/ml

链霉素: 100 单位/ml

Streptomütsiin: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Muud lisandid: üksikud{0}}rakkude proliferatsioonifaktorid ja väikese molekuliga toidulisandid

保存条件

Säilitustingimused

-20 kraadi 保存,有效期 18 个月.

Hoida temperatuuril -20 kraadi, säilivusaeg 18 kuud

使用方法

Kasutusjuhend

培养基融化:

37 kraadi 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象, 静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Söötme sulatamine:

Sulatage sööde 37 kraadises veevannis. Pühkige välispind 70% etanooliga ja asetage kasutamiseks bioohutuskappi.
Märkus. Väikese koguse valge helbelise materjali ilmumine pärast sulatamist on normaalne. Laske söötmel 3–5 minutit seista, et helbed settiksid, seejärel koguge supernatant kasutamiseks.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0,8-1,5cell/孔/200ul培养基铺杍

Fusioonkaevude käsitlemine – terved rakud:

Heas seisukorras rakkudega (nt keskmise värvusega normaalsed või kergelt kollakad, mikroskoobi all olevad rakud terved, heledad ja normaalse suurusega rakud) fusioonikaevude puhul pipetige ettevaatlikult kollase pipetiotsaga üles-alla. Loendage rakud ja plaat 0,8–1,5 rakku süvendi kohta 200 µl söötmes.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Fusioonkaevude käsitlemine – suboptimaalsed rakud:

Suboptimaalses seisukorras rakkudega fusioonisüvendite puhul (nt keskmiselt hapendatud/kollased või rakud näivad mikroskoobi all kokkutõmbunud, tumedad) on järgnevaks subkloonimiseks saadaval kaks võimalust:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Valik 1: viige rakud fusioonisüvendist 24 süvendiga plaadile, mis sisaldab 1 ml seda söödet. Pärast 2–3-päevast laiendamist loendage rakud ja tehke subkloonimine 0,8–1,5 rakku süvendi kohta 200 µl söötmes. Selles etapis on rakkude kahekordistumine piiratud, kuid rakkude seisund on hea, mistõttu on see ideaalne subkloonimiseks.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培,庁5%37培CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5 rakku/孔/200ul培养基);

Eemaldage ettevaatlikult kollase pipetiotsaga supernatant fusioonisüvendist ja lisage igasse süvendisse 200 µL värsket söödet. Inkubeerida temperatuuril 37 kraadi, 5% CO₂ 3–4 tundi. Seejärel võtke rakkudest proov, loendage ja subkloonige 0,8–1,5 rakku süvendi kohta 200 µl söötmes.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Märkus. Hübridoomirakkude laiendamis- ja subkloonimissöötmega kultiveeritud subkloonid jõuavad tavaliselt allavoolu skriinimiseks või analüüsiks sobivasse etappi 6.–8. päeval pärast -subkloonimist.